УДК 636.4:612.017
Т.В. Мальцева (Новосибирский государственный аграрный университет)
Иммунокомпетентная система (ИКС) крупного рогатого скота на субполуляционном уровне пока что до конца не изучена, а имеющиеся публикации, к сожалению, носят фрагментарный характер. В этой связи перед нами была поставлена задача, изучить динамику субпопуляций Т-клеток, В-лимфоцитов, иммуноглобулинов Ig M и G и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в постнатальный период развития.
Иммунологическое тестирование телят проводили в ПСХК «Морские Нивы» и в лаборатории иммунологии кафедры физиологии и биохимии животных ФГОУ ВПО «Новосибирский госагроуниверситет».
Серия опытов проведена на поголовье черно-пёстрого голштинизированного скота. Изучение динамики дифференцировки Т-клеток и гуморального звена иммунитета у телят проводили сразу после их рождения, а затем в суточном возрасте и далее по схеме: на 7-й, 14-й, 30-й, 60-й, 90-й, 120-й, 150-й,180-й, 360-й дни и в 18-месячном возрасте.
Для оценки Т-клеточного звена ИКС определяли содержание в крови тотальных Т-лимфоцитов (тЕ-РОК), Т-индукторов-хелперов (рЕ-РОК), Т-киллеров-супрессоров (вЕ-РОК) и активированных Т-клеток (бЕ-РОК) реакцией спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, используя разные режимы инкубации. Идентификацию В-лимфоцитов (ЕМ-РОК) проводили методом розеткообразования с эритроцитами мыши. Содержание IgM и IgG определяли методом радиальной иммунодиффузией по Манчини с использованием специфических антисывороток к иммуноглобулинам крупного рогатого скота. Для определения концентрации ЦИК в сыворотке крови у телят использовали метод ПЭГ-преципитации (ПЭГ6000).
Анализ результатов исследований показал, что у телят в одно- и двухнедельном возрасте имело место стабильность в содержание тЕ-РОК (Р<0,001) (табл.1). Затем до двухмесячного возраста уровень тЕ-РОК возрастал. С трехмесячного и до случного возраста величина тЕ-РОК была нестабильной. Каждое повышение доли тЕ-РОК, зафиксированное на 120-е (Р<0,01), 180-е (Р<0,001) сутки жизни и в 18-месячном возрасте (Р<0,01), сопровождалось последующим снижением их продукции (Р<0,001). При анализе динамики функционально зрелых клеток, было установлено, что у новорожденных телят численное преимущество принадлежало вЕ-РОК, в то время как количество рЕ-РОК и бЕ-РОК оставалось на низком уровне. В суточном возрасте у животных наблюдалось увеличение рЕ-РОК и бЕ-РОК, при одновременном снижении числа вЕ-РОК (Р<0,001). К 30-дневному возрасту генез Т-индукторов-хелперов увеличивался, а затем динамично снижался, однако к 180-му дню было зарегистрировано еще одно его повышение (Р<0,001). Образование вЕ-РОК в первую неделю жизни телят снизилось в 2,2 раза (Р<0,001). Рост в циркуляции Т-киллеров-супрессоров происходил с 30-го по 90-й дни жизни телят. В последующем с 4-месячного возраста до года процесс дифференцировки характеризовался уменьшением в циркуляции количества вЕ-РОК (Р<0,001). Значительный подъем показателя активированных Т-лимфоцитов был выявлен у суточных телят (Р<0,001). Далее тенденция роста бЕ-РОК продолжалась до 30-дневного возраста (Р<0,001). Затем концентрация бЕ-РОК в рециркуляции снизилась в 1,6 раза (Р<0,001).
Таблица 1. Содержание тотальных, Т-индукторов-хелперов, Т-киллеров-супрессоров и активированных Т-клеток у телят в связи с возрастом, %
Возраст, дни |
тЕ-РОК |
рЕ-РОК |
вЕ-РОК |
бЕ-РОК |
при рождении |
41,6+0,23 |
0,82+0,63 |
23,3+0,39 |
0,69+0,27 |
1 |
49,1+0,21 |
16,9+0,42 |
12,8+0,48 |
10,0+0,57 |
7 |
55,6+0,16 |
24,7+0,65 |
10,6+0,54 |
13,3+0,28 |
14 |
57,1+0,13 |
20,3+0,81 |
15,2+0,35 |
13,6+0,37 |
30 |
67,4+0,21 |
25,6+0,41 |
15,5+0,67 |
18,1+0,74 |
60 |
70,7+0,64 |
27,3+0,66 |
17,2+0,43 |
16,2+0,25 |
90 |
64,0+0,68 |
26,8+0,24 |
22,4+0,62 |
16,3+0,51 |
120 |
67,9+0,39 |
25,1+0,63 |
18,6+0,73 |
16,1+0,32 |
150 |
63,8+0,61 |
21,0+0,44 |
15,1+0,61 |
10,2+0,71 |
180 |
69,3+0,17 |
30,9+0,76 |
13,8+0,31 |
12,4+0,45 |
360 |
61,2+0,27 |
26,6+0,61 |
11,5+0,45 |
11,6+0,26 |
18 мес. |
67,5+0,19 |
27,7+0,53 |
17,9+0,38 |
18,3+0,21 |
Тенденция роста В-лимфоцитов в крови наблюдалась с 7-го по 14-й дни жизни телят (Р<0,001) (табл.2). Максимальное содержание данного вида клеток в циркуляции у телят выявлено в годовалом возрасте, а через полгода (18 месяцев) оно снизилось.
У новорожденных телят, обследованных до первой выпойки молозива, содержание сывороточных IgМ и IgG в крови не обнаружено, так же как и ЦИК. Максимальное содержание IgM за весь период наблюдения зафиксировано в 30-дневном возрасте. Низкий уровень этого показателя выявили в 3-месячном возрасте (Р<0,01). Содержание молозивных IgG в однодневном возрасте было максимальным. Далее до 2-месячного возраста концентрация IgG была не стабильной. Однако анализируемый показатель с трехмесячного возраста несколько стабилизировался.
Таблица 2. Динамика В-лимфоцитов (%), иммуноглобулинов М и G (г/л), и
циркулирующих иммунных комплексов (у.е.) у телят в онтогенезе, %
Возраст, дни |
ЕМ-РОК |
IgM |
IgG |
ЦИК |
при рождении |
3,37+0,28 |
0,00 |
0,00 |
0,00 |
1 |
4,00+0,12 |
1,78+0,31 |
21,2+0,44 |
3,02+2,91 |
7 |
4,80+0,37 |
2,97+0,19 |
17,1+0,62 |
15,82+3,6 |
14 |
11,3+0,12 |
2,35+0,21 |
14,1+0,78 |
32,14+2,6 |
30 |
6,60+0,14 |
3,41+0,40 |
15,8+0,67 |
64,71+1,9 |
60 |
7,02+0,09 |
2,65+0,33 |
13,7+0,41 |
61,83+2,3 |
90 |
8,51+0,31 |
1,74+0,06 |
12,0+0,34 |
86,05+3,3 |
120 |
9,84+0,56 |
2,07+0,12 |
12,1+0,62 |
93,51+3,7 |
150 |
11,6+0,42 |
2,31+0,27 |
12,7+0,50 |
154,6+2,5 |
180 |
9,16+0,19 |
1,91+0,18 |
11,5+0,35 |
150,9+4,3 |
360 |
12,7+0,15 |
2,42+0,28 |
13,4+0,68 |
207,4+4,1 |
18 мес. |
10,3+0,61 |
2,43+0,16 |
11,9+0,71 |
197,5+2,6 |
Концентрация ЦИК в крови суточных телят составляла 3,02+2,91 у.е. Рост иммунных комплексов продолжался до 30-го дня жизни (Р<0,001). Однако к 60-му дню происходило снижение уровня ЦИК. В последующие сроки концентрация изучаемого показателя увеличилась (Р<0,001), однако через полгода опять имело ее снижение (Р<0,05).
В постнатальный период развития телят выявлено несколько этапов становления клеточного и гуморального звеньев иммунной системы, соответствующих онтогенетическим особенностям формирования эндокринной и центральной нервной систем, и условиям содержания и кормления данного вида животных.
THE CHARACTERISTIC AND RELATIONSHIPS OF CATTLE CELL AND HUMORAL IMMUNE SYSTEMS
T.V. Maltseva
The cattle T cell differentiation it was studied as well as the dynamics of and CIK, mechanisms of the relationships of cattle cell and humoral immune systems.